超靈敏電化學發光免疫分析技術 Electrochemiluminescence (ECL)_Intracellular signaling

Intracellular signaling assays:






  • GPCR-ligand binding proteins
  • Phosphoproteins
  • Ubiquitinated Proteins







    • 資料來源: Meso Scale Discovery 原廠網站
                      第三代免疫分析技術 殷彥
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    石墨電極微孔盤（ MSD 獨家專利）可包覆：懸浮細胞、貼壁細胞、抗體、蛋白質、多肽、病毒顆粒及細胞膜類似物等。 可應用於： (1)  生物標誌物偵測（細胞因子、分泌型蛋白質與細胞內磷酸化蛋白質） (2)  生物藥藥物代謝與免疫原性 (3)  生物藥物的高通量篩選 :  Cell Based Assay 、 Epitope Binning Assays 、 solution       equilibrium  kinetic exclusion KD measurement (MSD-SET) (4)  生物藥物品質管控： Lingand binding Assay 、  CHO 宿主細胞殘留、生物活性 (5)  小分子藥物的高通量篩選： Cell Based Assay (6)  疫苗的血清學免疫原性檢測：自行開發多因子檢測，單個樣品同時檢測 10 種免疫原性，節        約 80% 的時間。 (7)  自身抗體檢測：過敏、病毒與中和抗體 … 等。 MSD  多重偵測矩陣石墨電極微孔盤設計 在一個微孔內有不同的多重偵測矩陣，且有 96 孔及 384 孔石墨電極微孔盤可供選擇。 MSD 提供 2 種不同表面材質 石墨電極微孔盤 微孔盤 : Standard Plate:  疏水性材質 High Bind Plate:  親水性材質 微盤工作電極尺寸和表面材質決定了生物物質可包覆量的多寡: 石墨電極微孔盤包覆固定流程 : 由於微孔盤特殊石墨表面，可包覆 懸浮細胞、貼壁細胞、抗體、蛋白質、多肽、病毒顆粒及細胞膜類似物 … 等斗可直接包覆固定在高結合能力的微孔盤上。包覆固定流程，如下 : (1) Solution Coating:  和傳統 ELISA 包覆流程類似 (2) Spot Coating:  只將生物物質包付固定於工作電極上，大幅降低包覆使用體積 ...
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    PD-1 和 LAG-3 雙特異抗體 Bioassay 日前 MacroGenics 公司宣佈該公司開發的兩款新藥的臨床開發進展；名為 MGD013 的新藥能夠同時靶向免疫檢查點 PD-1 和 LAG-3 ，目前第一名患者開始接受 MGD013 治療。  MGD013 能夠同時與表達在 T 淋巴細胞表面的免疫檢查點分子 PD-1 和 LAG-3 相結合。 MGD013 在血清中的半衰期很長，通過同時阻斷這兩個免疫檢查點分子的免疫抑制，它具有治療多種不同癌症的潛力。今年早些時候 MacroGenics 公司已經為 MGD013 向 FDA 遞交了 IND 申請。 文中( US 20170137517 A1) 介紹了 PD-1 和 LAG-3 雙特異性抗體的分析方法： SEB Activated Human PBMC Assay ,  Mixed Lymphocyte Reaction (MLR) Assay,  Engineered Bispecific Jurkat.hPD-1.LAG-3 Bioassay ，其中均使用了 MSD超靈敏電化學發光免疫分析技術 。 資料來源 :  Meso Scale Discovery  原廠網站                    第三代免疫分析技術   殷彥                    騰達行企業股份有限公司
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    MSD超靈敏電化學免疫發光技術預測第1型糖尿病風險 MSD超靈敏 電化學發光免疫分析技術 適合開發高靈敏度的多因子偵測，在自身抗體檢測方法中能檢測到弱親和力的自身抗體，從而更早預測疾病。 邁阿密大學米勒醫學院研究員利用 MSD  超靈敏電化學發光免疫分析技術 分析顯示增加自身抗體檢測而提高預測第1型糖尿病（ type 1 diabetes； T1D）。 因此，研究了 第1型糖尿病 患者的親屬，以確定MSD超靈敏電化學發光免疫分析技術測定是否可用於改善針對單GADA陽性個體或單mIAA自身抗體個體的第一型糖尿病風險評估。 應用實例:  邁阿密大學米勒醫學院應用MSD超靈敏電化學發光免疫技術預測第1型糖尿病風險 資料來源:  Meso Scale Discovery 原廠網站                    第三代免疫分析技術 殷彥                    騰達行企業股份有限公司
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    超靈敏電化學發光免疫分析技術 Electrochemiluminescence (ECL)_AD QC

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    美國阿茲海默症協會 建立的 The Alzheimer’s Association QC Program 腦脊髓液 (CSF) 生物標誌 tau 和 amyloid ß （ A β）在阿茲海默症的診斷上可望成為有效的工具，並可在阿茲海默症臨床試驗中監測治療效果。然而，最近有許多研究中心指出，不同研究中心和實驗室之間這些腦脊髓液生物標誌的水平有所不同。實驗室間腦脊髓液生物標誌水平的差異，使研究和試驗複雜化，並且也影響了在臨床常規中引入適用的臨界值。各研究中心之間的腦脊髓液生物標誌水平的差異可能是由樣品前處理程序（例如腰椎穿刺程序和腦脊髓液樣品處理）或分析腦脊髓液生物標誌檢測試劑組的批次間變化造成；所以 QC program 的目標是標準化研究和臨床實驗室之間的腦脊髓液生物標誌測量。這將提高分析精度並改善生物標誌測量的縱向穩定性。該計劃將允許在實驗室之間進行生物標誌物水平的直接比較，並因此在出版文獻之間進行比較。 QC Program 從 2009 年開始，目前有 98 個研究中心參與，目前建議的檢測平台中主要有 : 有 MSD (Meso Scale Discovery) 和 Innogenetics (Fujirebio Europe N.V.) 兩家公司的三種平台，其中 Innogenetics 為專門生產 IVD 檢測試劑組的公司，由此可見 MSD 雖非 IVD 的產品，卻可與 IVD 的產品同時比較建立一個標準化的流程，已期許利用腦脊液生物標誌檢測協助阿茲海默症的診斷與監測治療效果。 資料來源 : 美國阿茲海默症協會QC Program網站                     Meso Scale Discovery  原廠網站                    第三代免疫分析技術   殷彥                    騰達行企業股份有限公司 ...
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    帕金森氏症關鍵蛋白質LRRK2致病機制!! 根據先前研究，L eucine-rich-repeat kinase 2 ( LRRK2)蛋白質的變異在遺傳性帕金森氏症中扮演關鍵角色；LRRK2蛋白質屬於ROCO protein family的一員，包括與受體的結合、磷酸激酶，以及GTP酶等功能，其中GTP酶的活性與LRRK2的單體及雙聚體的平衡息息相關，至於如何調控單體和雙聚體的機制則尚未清楚；但最近比利時布魯塞爾自由大學的研究團隊提出了一個可能的調控機制，發表在Nature Communications期刊，此調控機致大致如下: 當GTP結合LRRK2雙聚體時，會造成雙聚體結構改變趨向單體化而進行GTP的水解成GDP，然而GDP會再驅使單體LRRK2形成雙聚體，造成一個單體-雙聚體的循環；若LRRK2發生突變，導致雙聚體更穩定，雙聚體的單體化會受到影響，而降低GTP水解速度，因此對遺傳性帕金森氏症造成影響。超靈敏電化學發光免疫分析技術 Electrochemiluminescence (ECL)平台，最近發表了R-PLEX Human LRRK2 及LRRK2 pS935 antibody set，搭配U-PLEX提供一個高靈敏度與寬偵測範圍的分析平台。                             R-PLEX Human LRRK2 Antibody Set Calibration Curve 原文聯結 資料來源 :   Meso Scale Discovery  原廠網站                    第三代免疫分析技術   殷彥                    騰達行企業股份有限公司
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    超靈敏電化學發光免疫分析技術 Electrochemiluminescence (ECL)_組織均質液樣品

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    組織勻質液樣品，如使用 Western Blot 、 ELISA 容易出現以下問題： （ 1 ）樣本用量較大，珍貴樣品用量不足。 （ 2 ） 樣品基質複雜，容易導致實驗結果差異大；尤其是 WB 再現性差， CV 差異遠大於           20% ，往往要做一份樣品要測 3 重複。 （ 3 ）一些高含量的蛋白質，超過 WB/ELISA 偵測上限，訊號過強，需要重新測試實驗條件。 （ 4 ）一些低含量的蛋白質，低於 WB/ELISA 偵測下限，檢測不到，無計可施。 （ 5 ） WB 時間長，步驟多，常見問題和常見解決方案多，遇到問題，解決起來繁瑣耗時。 相對的，若使用MSD 超靈敏電化學發光免疫分析技術 系統可克服上述 問題： （ 1 ） 10 - 20% 的樣品用量。 （ 2 ） CV 在 20%  以內，一份樣品重複 2 次，或者不重複也可。 （ 3 ） MSD （ Meso Scale Discovery ）偵測範圍廣，容易一次性檢測出不同含量的蛋白質。 （ 5 ）多篇 SCI 文獻報導 MSD （ Meso Scale Discovery ）和 WB 的資料趨勢一致，而且有           更高的樣品檢出率。 （ 6 ） AKT, MAPK,  細胞凋亡， EGFR  等訊息傳導可使用一個試劑盒檢測。 ( 點擊連 結，可查看試劑組清 單） （ 7 ） 組織勻質液樣品的處理， MSD 建議如下： Tissue Homogenates with MSD Assays This is a very general protocol for tissue homogenates that has worked well on ourplatform. The tissue pulverization technique described below is a sonicator butyou can use a tissue grinder or an alternate tool.  Some scientists use...
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    潛力很大的生物相似性藥物?! 何謂生物相似性藥物? 根據衛生福利部食品藥物署2015年公告的 生物相似性藥品查驗登記基準的定義: 以生物技術衍生之生物藥品，於品質、安全及療效上與獲得我國核准之原開發廠生物藥品 ( 參考品， reference drug) 相似，範圍，包含 : 重組胜肽、重組蛋白質；但不包含 : 疫苗、致敏原、血液及血漿衍生製劑及其重組替代物，以及如基因或細胞治療產品等。 由  IMS Health 資料顯示， 2011 年全球生技藥品市場約 1,570 億美元，占整體藥品市場的 16.4% ，預測 2016 年生技藥品市場將超過 2,000 億美元； 2011 年全球生物相似性藥品市 場約 6.9 億美元，估計 2016 年將成長至 20-40 億美元；隨著生技藥品市場的成長， 生物相似性藥物的成長也必然可期。 生物藥品不像小分子藥物般分子量小、結構簡單，可以達到化學物理性質完全一樣 (identical)； 生物相似性藥分子量大及結構複雜，無法達到與參考藥品 化學物理性質完全一樣， 而是要證明它與參考藥品有多相似，且不相似處是否有臨床上的意義； 其中 安全性的評估，就成為重要的關鍵指標。就 安全性的評估 有兩大特殊需求 : 第一、藥物安全監視計畫及風險管理計畫；第二、 免疫原性之偵測 ，因為安全結果無法利用動物實驗中預知，且不同適應症有不同風險，只能透過臨床實驗及安全監視來驗證；在 生物相似性藥品查驗登記基準中也有明確指出分析方法需隨現今分析技術科技的進展，選擇適當靈敏度的分析平台，著眼於此， MSD 超靈敏電化學發光免疫分析技術 是符合目前、甚至未來10年需求的分析技術，也難怪世界各大藥廠及生技公司都以此平台研究開發相關產品或偵測平台。 資料來源 :   Meso Scale Discovery  原廠網站                    第三代免疫分析技術   殷彥                     生物相似性藥品查驗登記基準 ( FDA 藥字第...
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    超靈敏電化學發光免疫分析技術 Electrochemiluminescence (ECL)_PD1_SF

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    Sanofi ：小鼠腫瘤模型的 PD-1 抗體濃度與 PBMC 細胞因子風暴 REGN2810 是由美國傑納隆藥廠 (Regeneron) 和賽諾菲 (Sanofi) 聯合開發的一款針對 PD-1 的免疫檢查點抑制劑藥物。 目前，關於 REGN2810 的臨床試驗共有 8 項，其中在轉移性非小細胞肺癌中的與鉑化療對比的研究已經進行到 3 期。在 2017 年美國臨床腫瘤學會（ ASCO ， American Society of Clinical Oncology ）年會上， 傑納隆藥廠 和賽諾菲發佈了關於 REGN2810 臨床試驗結果的口頭報告（ Abstract #9503 ），發表了針對晚期皮膚鱗狀細胞癌患者的 1 期劑量爬坡試驗結果（ NCT02383212 ）。本次試驗中，客觀緩解率（ ORR ， overall response rate ）達到了 46.2% ，在 26 例病人中，共有 2 例完全緩解， 9 例部分緩解， 1 例未經證實的部分緩解。疾病控制率（ DCRR ， disease control rate ）更是達到了 69.2% ，其中包含 12 例的客觀緩解和 6 例疾病穩定。在此次資料披露中，由於還未達到無進展生存期和總生存期的資料披露截止日期，所以還未得知 PFS 和 OS 。但值得注意的是，有 10 位元患者在資料統計截止時，仍然保持著對藥物的反應。 Sanofi 在 PD-1 藥物研究中，使用 MSD超靈敏 電化學發光免疫分析技術 偵測 PBMC 細胞因子與小鼠腫瘤動物模型的 PD-1 抗體濃度。   Cytokine release following human PBMC exposure to immobilized REGN2810,REGN2329 (TGN1412) and anti-CD3 (OKT3) antibodies.  原文聯結 資料來源 :  Meso Scale Discovery  原廠網站                    第三代免疫分析技術   殷彥   ...
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    超靈敏電化學發光免疫分析技術 Electrochemiluminescence (ECL)_Normal Sample Test

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    MSD V-Plex 正常檢體樣品檢出率!! 在所有多重因子偵測平台中，面對一個很大的挑戰---正常檢體檢出率；一個常見的實驗設計裡，通常包含了實驗組(特定疾病檢體)及對照組(正常檢體)，利用多重因子偵測平台偵測分析，探討兩組數據之間的差別，但由於正常檢體的目標蛋白質濃度通常偏低，導致低於偵測平台的偵測極限，影響實驗結果。有鑒於此，MSD超靈敏電化學發光免疫分析技術在V-Plex的試劑組說明書中均載明了在正常檢體不同目標蛋白質的檢測範圍及檢出率，甚至提供了不同檢體類型的數據，讓使用者可以選擇最符合經濟效益、最適合自己實驗設計的客製化試劑組合，解決正常檢體檢出率的問題。 資料來源 :   Meso Scale Discovery  原廠網站                    第三代免疫分析技術   殷彥                    騰達行企業股份有限公司
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