組織勻質液樣品,如使用 Western Blot 、 ELISA 容易出現以下問題: ( 1 )樣本用量較大,珍貴樣品用量不足。 ( 2 ) 樣品基質複雜,容易導致實驗結果差異大;尤其是 WB 再現性差, CV 差異遠大於 20% ,往往要做一份樣品要測 3 重複。 ( 3 )一些高含量的蛋白質,超過 WB/ELISA 偵測上限,訊號過強,需要重新測試實驗條件。 ( 4 )一些低含量的蛋白質,低於 WB/ELISA 偵測下限,檢測不到,無計可施。 ( 5 ) WB 時間長,步驟多,常見問題和常見解決方案多,遇到問題,解決起來繁瑣耗時。 相對的,若使用MSD 超靈敏電化學發光免疫分析技術 系統可克服上述 問題: ( 1 ) 10 - 20% 的樣品用量。 ( 2 ) CV 在 20% 以內,一份樣品重複 2 次,或者不重複也可。 ( 3 ) MSD ( Meso Scale Discovery )偵測範圍廣,容易一次性檢測出不同含量的蛋白質。 ( 5 )多篇 SCI 文獻報導 MSD ( Meso Scale Discovery )和 WB 的資料趨勢一致,而且有 更高的樣品檢出率。 ( 6 ) AKT, MAPK, 細胞凋亡, EGFR 等訊息傳導可使用一個試劑盒檢測。 ( 點擊連 結,可查看試劑組清 單) ( 7 ) 組織勻質液樣品的處理, MSD 建議如下: Tissue Homogenates with MSD Assays This is a very general protocol for tissue homogenates that has worked well on ourplatform. The tissue pulverization technique described below is a sonicator butyou can use a tissue grinder or an alternate tool. Some scientists use...
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